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单宁检测分析

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     单宁又称鞣质、单宁酸、鞣酸、丹宁酸或没食子酸,实际上它是一个笼统的名称,由五倍子酸、间苯二酚、间苯三酚、焦桔酚和其它酚衍生物组成的复杂混合物,常与糖类共存。溶于水、乙醇及丙酮几乎不溶于苯、氯仿、醚及石油醚,露置空气中颜色变黑。

    单宁广泛存在于植物的芽、叶、根、树皮和果实以及寄生于植物的昆虫所产生的虫瘿中,主要用于医药、食品、化妆品、革鞣、造纸、墨水、印染、橡胶、冶金等工业以及水处理等方面,也可作为蛋白质和生物碱的沉淀剂、啤酒和葡萄酒的澄明剂、橡胶的凝结剂等。

    我公司针对单宁物质,建立一整套的检测方法,可提供总单宁含量检测、单宁单体含量检测、单宁分子量检测等。详见下表。

服务名称

服务内容

测试方法

服务周期

总单宁含量

测定样品中总单宁含量

化学法

15个工作日

单宁单体含量

测定样品中儿茶素、没食子酸、单宁酸等8种单体含量

HPLCLC-MS

15个工作日

单宁分子量

测定单宁多聚体的分子量

GPC-RI-MALSMALDI-TOF

15个工作日

    单宁种类很多,分子结构复杂,差异也大,但可分成二大类:可水解鞣质(单宁酸,tannin acid)与缩合鞣质(condensed tannin)两种。

    可水解鞣质具有酯式或甙式结构,大多数由没食子酸(Gallic acid)或其衍生物与葡萄糖结合而成,糖上的每一个醇羟基都与没食子酸上的一个羟基结合成酯,可被酸、碱、酶水解。含这类鞣质的中草药有五倍子、没食子、石榴果皮等。水解鞣质在医药上已提纯应用为消炎收敛药,名鞣酸。没食子酸(Gallic acid)及单宁酸(可水解鞣质,tannin acid)标准品可以获得,可以利用HPLC分析、定量。

    缩合鞣质 一般由儿茶素(Catechin)组成,结构复杂,不能水解,加酸加热能产生一种缩合物质--鞣酐(或名鞣红Phlobaphenes),中草药中的鞣质多数属于缩合鞣质。对五倍子鞣质的结构有不同看法,一般认为代表性的结构式为β--间双没食子酰葡萄糖。因为没有固定的聚合度,因此分析起来比较棘手。

针对于缩合鞣质,一般分析思路为:

1、通过酸解将缩合单宁水解为黄酮类单体,再通过HPLC分析单体的重量及含量;

2、通过13C-NMR分析缩合单宁中可能存在的键合结构;

3、通过MALDI-TOF分析缩合单宁的聚合度;

4、即使经过上述步骤,只能获得缩合单宁的单体信息,键合信息、聚合度,亦不能解析缩合单宁的缩合顺序。

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