甲基化分析是研究糖类结构的重要化学方法,它广泛用于多糖和寡糖中单糖残基间连接位置的确定。华士特生物糖组分析平台,多糖甲基化分析(多糖键合结构解析)主要过程是:将多糖中游离羟基全部甲基化,然后水解得到部分甲基化的单糖,将这些单糖还原和乙酰化,最后用GC/MS测定部分甲基化衍生物的种类和数量,GC/MS质谱库进行检索,根据谱库数据结合部分甲基化的糖醇乙酰酯衍生物(PMAA)的电离规律,对特征峰进行识别和解析,推测出糖苷键的连接方式,得到单糖残基连接方式的定性和定量分析。对于特殊多糖和寡糖样品的甲基化分析,比如含糖醛酸的多糖,可通过比较羧基还原前后的甲基化结果来判断糖醛酸残基的连接方式,还原性寡糖应先转化为非还原性衍生物(如糖醇)再进行甲基化反应。
图 多糖甲基化分析(糖苷键连接方式解析)流程
服务内容:
(1)中性多糖甲基化分析,包括甲基化反应、水解、还原、乙酰化以及GC-MS分析等,获糖苷键连接位点、糖残基连接方式和摩尔百分比以及质谱图等
(2)酸性多糖甲基化分析,包括糖醛酸还原、甲基化反应、水解、还原、乙酰化以及GC-MS分析等,获取单糖残基之间糖苷键位置、连接方式和摩尔百分比以及质谱图等
(3)修饰多糖甲基化分析,结合红外光谱和核磁测试数据,推断糖残基连接方式分析、取代基团种类、取代位置和数量等信息,开展多糖衍生物结构鉴定
(4)多糖甲基化后上机数据分析,单糖残基连接方式分析
(5)利用多糖甲基化分析数据,结合单糖组成测定和多糖核磁测试结果,进行多糖结构核磁图谱解析