iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）技术是由美国应用生物系统公司ABI研发的一种多肽体外标记技术。该技术采用4种或8种同位素的标签，通过特异性标记多肽的氨基基团，然后进行串联质谱分析，可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量。
iTRAQ试剂由三部分组成：报告基团、质量平衡集团和肽反应标记试剂基团，形成4种或8种相对分子质量均等量的异位标签。iTRAQ试剂用于标记酶解后的肽段。在质谱图中，任何一种iTRAQ试剂标记的不同样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。在串联质谱中，报告基团、质量平衡基团和多肽反应基团之间的键断裂，质量平衡基团丢失，带不同同位素标签的同一多肽产生不同的报告离子，根据报告离子的信号强度值可获得样品间相同肽段的定量信息，再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。
iTRAQ定量技术流程图
实验流程
技术特点
可同时对2-8种不同条件样品进行蛋白质差异分析。
具备广泛的适用性：胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等。
自动化程度高，定性与定量同步进行，结果可靠准确。
与凝胶分离的蛋白质定量技术相比，iTRAQ质谱定量技术可检测到更多类型的蛋白质分子，如低丰度蛋白质、强酸性蛋白质、＜10KD或＞100KD的蛋白质分子。
应用领域及范围
疾病标志物筛选、作用机制研究、植物抗逆研究、药物作用靶点研究、特殊功能蛋白质筛选、物种蛋白质草图构建。
适合大样本量的定量比较，对无法用标记定量实现的实验设计，用label-free技术。
样品要求
注：尿液样品需提供5mL以上的量。
真菌孢子类样品，送样量加倍。
血清、血浆、脑脊液等样品需去除高峰度蛋白。
植物花瓣、根、茎、果皮、果肉，以及动物含脂肪的组织送样量加倍。
蛋白缓冲液中不能含有SDS、NP40、Triton、X-100各类去污剂。
项目周期
