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LC-MS测试

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LC-MS测试

  设备配置  Agilent UPLC-QQQ-MS(1290-6470)、UPLC-QTOF-MS(1290-6545)。
  平台特点  灵敏度高,高分辨质荷比,结果对比METLIN,HMDB数据库
 
  检测范围
  易电离物质非靶向性广筛,也常用于次生代谢物的靶向性研究
  1. 针对小分子代谢物进行广筛,提供相对定量结果
  2. 针对目标代谢物进行精确定性定量分析
  QQQ可用于靶向性研究,精准定量检测分析植物甾醇、神经酰胺、总脂肪酸、游离脂肪酸、短链脂肪酸、胆汁酸、磷脂、类花生酸、花生四稀酸、氨基代谢物、肠道菌群共生代谢物、肉碱、胆碱、TCA中间产物、CoA和氨基代谢物等。
 
  液质联用(LC-MS)的应用
  不挥发性化合物分析测定;极性化合物的分析测定;热不稳定化合物的分析测定;大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析测定。
 
  如何看质谱图
  (1)确定分子离子,即确定分子量
  氮规则:含偶数个氮原子的分子,其质量数是偶数,含奇数氮原子的分子,其质量数是奇数。与高质量碎片离子有含量的质量差,凡质量差12在3~8和10~13,21~25之间均不可能,则说明是碎片或者杂质。
 
  (2)确定元素组成,即确定分子式或者碎片化学式
  高分辨质谱可以由分子量直接计算出化合物的元素组成从而推出分子式。
  低分辨质谱利用元素的同位素丰度。
 
  (3)峰强度与结构的关系
  丰度大反应离子结构稳定。
  在元素周期表中自上而下,从右到左,杂原子外层未成键电子越易被电离,容纳正电荷能力越强,含支链的地方易断,这同有机化学基本一致,总是在分子最薄弱的地方断裂。
  不同类型有机物有不同的裂解方式
  相同类型有机物有相同的裂解方式,只是质量数的差异需要经验记忆。
 
  质谱解析的一般步骤
  (1)核对获得的谱图,扣除本底等因素引起的失真,考虑操作条件是否适当。
  (2)综合样品其他知识:例如熔点、沸点,溶解性等理化性质,样品来源,波谱数据等。
  (3)尽可能判断出分子离子。
  (4)假设和排列可能的结构归属:高质量离子所显示的,在裂解中失去的中性碎片,如M-1,M-15,M-18,M-20,M-31,意味着失去H,CH3,H2O,HF,OCH3等等。
  (5)假设一个分子结构,与已知参考谱图对照,或取类似的化合物,并作出他的质谱图进行对比。
 
 
 
 
 

 

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